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糖尿病足是糖尿病的難治性繼發疾病,患者在晚期往往面臨著截趾、截足、截肢的悲慘結局。糖尿病患者足部潰瘍多發生于罹患糖尿病10年后,病程超過20年者,糖尿病足的發生率可達到50%。目前我國糖尿病患者高達四千萬至六千萬人,其中10%-50%會逐漸發展為糖尿病足,足壞疽的發生率約為0.9%~1.7%,60歲以上老年糖尿病患者壞疽者約占2.8%~14.5%。 近幾年,人們逐漸認識到以病人固有的血管為基礎,通過血管新生建立豐富的側枝循環(arteriogenesis),是糖尿病足等血管閉塞性疾病的最佳治療策略之一,稱為治療性血管新生(therapeutic angiogensis)。以內皮祖細胞為基礎的細胞移植治療,和以血管生長因子為基礎的重組分子藥物治療,是達到上述目的的有效途徑。
骨髓中含有與血管新生有關的干細胞,即血管內皮祖細胞。自2002年日本學者報告利用骨髓有核細胞局部移植治療下肢缺血性疾病以來,多家單位尤其國內多個臨床單位開展了相同或相似的臨床研究,為包括糖尿病足在內的肢體缺血性疾病的治療提供了新的手段。
但是,在這種技術具體臨床應用過程中,臨床工作者逐漸認識到這種治療方法存在的缺陷,包括:
(1)新生血管形成速度較慢;
(2)部分病例無效;
(3)如用病人自體骨髓,采集量常為400ml左右,必須多點采集,增加了病人的痛苦;
(4)如利用動員外周血細胞治療,患者需首先接受粒系集落刺激因子(G-CSF)治療3-5天,以促使骨髓干細胞遷徙至外周血循環。但是,這種處理方式使血液粘稠度增加,增加病人血管栓塞的風險,少數病例在動員過程中出現心肌梗塞并發癥;
(5)部分病例出現復發。這些缺陷固然與患者的原發病有關,如糖尿病患者出現嚴重的動脈粥樣硬化后,新生小血管可并發再栓塞;但也與移植細胞的存活、細胞因子和生長因子分泌量等因素有關。因此,提高移植細胞的存活率,增加局部組織血管生長因子分泌量,能加速新生血管形成過程,并促進動脈血管的側枝循環建立。
近年來,人們發展了一種新的手段用于治療缺血性疾病;即應用血管生長因子促進和/或增加側枝動脈的形成,以增加缺血部位局部血液供應,改善其功能。但由于直接應用生長因子蛋白存在一些不足,如應用量大、作用時間短、成本昂貴等,而基因治療可提高生長因子的利用率。因此,基因治療為外周血管閉塞性血管病的治療開辟了一條新途徑。那么,選擇什么促血管再生因子作為基因治療的工具分子比較合適呢?
目前,已進入臨床試驗階段促血管形成細胞因子主要有三種,包括肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor, HGF)、血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor, bFGF),三者促血管形成能力相近。目前研究較多的是血管內皮生長因子,研究結果證實,VEGF能促進缺血肢體側枝循環的形成而達到治療缺血的效果,并已獲準進入臨床試驗。然而,VEGF可引起嚴重的局部組織水腫,因此,尋找一種更為安全有效的因子是必要的。
肝細胞生長因子是一種具有多種功能的細胞因子。我們的研究證實,HGF不僅促進肝臟修復,也可以促進血管內皮細胞的遷移和內皮細胞的增殖,增強局部血管新生。更為重要的是,HGF可以抑制低營養引起的細胞凋亡。細胞植入體內后脫離了特殊的微環境,只能通過微循環滲透方式攝取營養,而營養所及范圍在100-200μm之間。因此,90%以上的細胞在植入的幾天內因營養缺乏而很快死亡,細胞不能有效地增殖分化,延緩了血管再生過程。HGF不僅具有促血管再生作用,其細胞保護作用提高了移植細胞的生存機會,改善了在血管形成早期細胞的微環境。此外,HGF可趨化外周血的干細胞遷徙至組織修復部位,加快血管再生過程。
本中心利用骨髓單個核細胞群體中內皮祖細胞的分化特性,CD34陰性細胞分泌細胞因子和血管生長因子特性,結合HGF的促血管再生、促進干細胞遷徙和抗細胞凋亡作用,可達到加快血管新生的目的,為糖尿病足患者帶來新希望。
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